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FIJACIÓN

La fijación es el primer paso en cualquier procedimiento que tenga como fin conservar el tejido para su estudio histológico. Los fijadores coagulan las proteínas, haciéndolas insolubles e inducen la aparición de uniones entre distintas proteínas. Todos lo fijadores distorsionan el tejido hasta cierto punto, pero en general, la estructura celular general se mantiene.

En los montajes in toto donde la preservación del detalle citológico no es crítico, el fijador Carnoy puede ser el ideal por su fácil preparación.

Con una pipeta se deja caer el fijador , gota a gota, sobre el embrión hasta que se han cubierto todas la regiones. después de 10 minutos, bañar el embrión con fijador. Esperar otros 10 minutos y transferir el embrión a un frasco con fijador. etiquetar el frasco con la fecha y la fase aproximada del desarrollo del embrión.

Los embriones deben fijarse un mínimo de dos horas y un máximo de 2 o 3 dias. Después de la fijación viene el lavado y tinción que se puede realizar en el propio frasco.

LAVADO

Para lavar el embrión de fijador ha de estar por lo menos 8 horas en una solución de alcohol 70%. Debe de cambiarse la solución por lo menos una vez a la semana para asegurarse que no quedan rastros del fijador. Posteriormente se deshidrata por completo, se aclaran y se montan sobre un portaobjetos para su observación al microscopio fotónico.

Fijador de Carnoy:

Ácido acético glacial ................ ........................ 100ml.

Etanol 100% ............................... ..................... 300ml.

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